Die Durchflusszytometrie ermöglicht die Hochdurchsatz-Analyse einzelner Zellen und liefert präzise Daten zu Zellpopulationen, Zellzyklus-Phasen und Proteinexpression. Unverzichtbar dafür sind fluoreszente Sonden – und Fluorescein-5-isothiocyanat (FITC) gehört seit Jahren zu den am häufigsten eingesetzten Farbstoffen. FITC strahlt ein intensives Grün aus, lässt sich problemlos mit Antikörpern oder anderen Biomolekülen koppeln und bleibt dabei kostengünstig.

Im Zentrum steht die Konjugation von FITC mit Antikörpern, die spezifische Oberflächen- oder intrazelluläre Marker erkennen. Sobald diese FITC-gekoppelten Antikörper an ihre Antigene binden, trägt die jeweilige Zelle die fluoreszente Signatur. Beim Passieren der Messkammer registriert das System die Emission, so dass quantitative Aussagen möglich werden – FITC ist damit eine Schlüsselkomponente in der Durchflusszytometrie.

Wissenschaftler beschaffen den Farbstoff häufig online oder setzen auf vorkonjugierte Antikörper. Erfolgsentscheidend sind höchste Reagenzqualität und ein präzises Markierungsprotokoll. Wer selbst konjugiert, muss pH-Wert, Inkubationszeit und Reinigung des FITC-Konjugats besonders sorgfältig kontrollieren, um unspezifische Hintergrundfluoreszenz zu minimieren.

Trotz seiner Vielseitigkeit hat FITC Grenzen. Vor allem seine begrenzte Photostabilität – sogenanntes Photobleaching – kann bei längeren Messungen oder Mehrfarb-Analysen zu Signalverlust führen. Gegenstrategien: verkürzte Belichtungszeiten, photoprotektive Zusätze oder ein Wechsel zu robusteren Fluorophoren wie Alexa Fluor 488. Hinzu kommt die spektrale Überlappung von FITC mit anderen Farbstoffen, die im Multicolor-Panels über sorgfältige Versuchsgestaltung und Compensation aufgelöst werden muss.

Fazit: FITC überzeugt durch Bequemlichkeit, Reaktivität und durchdokumentierte Eigenschaften. Wer seine Limitierungen kennt, kann den Farbstoff effizient für zellbiologische Studien nutzen und aussagekräftige Ergebnisse erzielen.