تُعد المقايسات المناعية، مثل مقايسات الإيمونوسوربنت المرتبطة بالإنزيم (ELISA) والبصمات الغربية (Western blots)، أدوات قوية للكشف عن بروتينات أو أجسام مضادة محددة وقياس كميتها. ومع ذلك، يتمثل التحدي الشائع في هذه التقنيات في الارتباط غير النوعي المحتمل للأجسام المضادة أو كواشف الكشف بالمواقع بخلاف المستضد المستهدف. يمكن لهذا الارتباط غير النوعي أن يؤدي إلى إشارات خلفية عالية، مما يحجب النتائج الإيجابية الحقيقية ويضر بحساسية المقايسة ونوعيتها. يلعب الألبومين البقري (BSA) دورًا محوريًا في التخفيف من هذه المشكلة من خلال العمل كعامل حجب فعال.

مبدأ عمل الحجب الخاص بـ BSA بسيط ولكنه فعال للغاية. يُعد BSA بروتينًا كبيرًا نسبيًا، ومستقرًا، وغير تفاعلي إلى حد ما. عند إدخاله إلى نظام المقايسة، فإنه يرتبط بسهولة بأي مواقع غير مشغولة على الدعامة الصلبة (مثل آبار الألواح الدقيقة، أو أسطح الأغشية) التي لا تشغلها المستضدات أو الأجسام المضادة المثبتة. من خلال شغل هذه المواقع غير النوعية للارتباط، ينشئ BSA حاجزًا ماديًا يمنع الأجسام المضادة أو كواشف الكشف من الارتباط بهذه المواقع.

في تقنية Western blotting، على سبيل المثال، بعد ارتباط الجسم المضاد الأولي ببروتينه المستهدف، عادةً ما يتم حضانة الغشاء مع BSA. تقوم هذه الحضانة بإشباع أي مواقع مفتوحة متبقية على الغشاء، مما يضمن أنه عند إضافة الجسم المضاد الثانوي المقترن بالإنزيم، فإنه يرتبط بشكل أساسي بالجسم المضاد الأولي وليس بالغشاء نفسه. هذا يقلل بشكل كبير من ضوضاء الخلفية، مما يسهل تصور وقياس نطاقات البروتين المحددة ذات الأهمية.

وبالمثل، في ELISAs، يُستخدم BSA لحجب المواقع غير المرتبطة في آبار الألواح الدقيقة بعد طلاء المستضد أو الجسم المضاد. هذه الخطوة ضرورية لمنع ارتباط الجسم المضاد للكشف أو الجسم المضاد المقترن بالإنزيم بشكل غير نوعي بسطح البئر، مما قد يؤدي إلى إشارات إيجابية كاذبة. يمكن تحسين تركيز BSA ووقت الحضانة للحجب بناءً على المقايسة المحددة والأجسام المضادة المستخدمة، ولكن بشكل عام، يكون تركيز 1-5٪ من BSA في محلول مناسب فعالًا.

علاوة على ذلك، غالبًا ما يُفضل BSA كعامل حجب عند العمل مع الأجسام المضادة الحساسة للكازين، وهو مكون شائع في محاليل الحجب المعتمدة على الحليب. على سبيل المثال، يمكن للأجسام المضادة الخاصة بالفوسفور، التي تستهدف الحاتمات المفسفرة، أن تظهر أحيانًا تفاعلًا متصالبًا مع الكازين. في مثل هذه الحالات، يوفر استخدام BSA كعامل حجب بديلاً أنظف، مما يمنع هذا التداخل ويضمن الكشف الدقيق عن البروتينات المفسفرة.

تُعزز إتاحة BSA بدرجات مختلفة، بما في ذلك الخالي من البروتياز والخالي من الأحماض الدهنية، من فائدته. يضمن BSA الخالي من البروتياز عدم إدخال الإنزيمات التي قد تحلل البروتين المستهدف أو الأجسام المضادة في النظام. يُفيد BSA الخالي من الأحماض الدهنية في المقايسات حيث قد تتداخل الأحماض الدهنية الحرة مع الكشف أو نشاط الجزيء المستهدف.

باختصار، يُعد الألبومين البقري كاشفًا لا غنى عنه في ترسانة تطوير المقايسات المناعية وتنفيذها. إن قدرته على حجب مواقع الارتباط غير النوعي بشكل فعال تعزز بشكل كبير حساسية المقايسة ونوعيتها وقابليتها للتكرار، مما يجعله حجر الزاوية للحصول على نتائج تحليل مناعي موثوقة.