IPTG в сине-белом скрининге: руководство для исследователей
В области молекулярной биологии и генной инженерии точная идентификация рекомбинантной ДНК внутри организмов-хозяев имеет первостепенное значение. Метод 'сине-белого скрининга' выделяется как краеугольная техника для этой цели, и в его основе лежит важнейший реагент: Изопропил-бета-D-тиогалактозид, широко известный как IPTG (CAS 367-93-1). Как ведущий производитель и поставщик высококачественных биохимических реактивов, понимание роли IPTG является жизненно важным для исследователей, стремящихся приобрести надежные реагенты.
IPTG функционирует как искусственный индуктор lac-оперона у бактерий, таких как E. coli. В частности, он действует как молекулярный имитатор аллолактозы, естественного индуктора. В присутствии IPTG связывается с белком-репрессором lac (LacI), вызывая конформационные изменения, которые отсоединяют репрессор от операторной области lac-оперона. Эта разблокировка позволяет транскрибировать нижележащие гены, наиболее важным из которых является ген lacZ, кодирующий фермент β-галактозидазу.
Магия сине-белого скрининга проявляется в комбинированном действии IPTG и хромогенного субстрата, обычно X-Gal (5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид). При экспрессии β-галактозидазы она расщепляет X-Gal, образуя нерастворимый синий осадок. В типичном сценарии клонирования ген интереса вставляется в плазмиду, которая содержит ген lacZ, часто нарушая его последовательность. Когда такая модифицированная плазмида вводится в клетки E. coli, содержащие IPTG и X-Gal, колонии, успешно поглотившие интактную плазмиду (без вставки гена), будут экспрессировать функциональную β-галактозидазу, расщеплять X-Gal и выглядеть синими. И наоборот, колонии, содержащие плазмиды с геном, вставленным в lacZ, не будут производить функциональную β-галактозидазу и останутся белыми. Это четкое визуальное различие позволяет исследователям эффективно отбирать колонии, несущие желаемую рекомбинантную ДНК.
Для ученых и менеджеров по закупкам в биотехнологическом и фармацевтическом секторах критически важен поиск IPTG высокой чистоты. Примеси могут мешать тонким регуляторным механизмам lac-оперона, приводя к ненадежным результатам скрининга. Поэтому выбор **ключевого поставщика** и **специализированного производителя**, такого как NINGBO INNO PHARMCHEM CO.,LTD., гарантирует приобретение продукта, соответствующего строгим требованиям к качеству, обеспечивая стабильную работу в ваших экспериментах по молекулярной биологии. Когда вам нужно купить IPTG для вашей лаборатории, учитывайте его чистоту, химическую стабильность и репутацию поставщика. Наше обязательство — предоставлять исследователям инструменты, необходимые для новаторских открытий.
Инвестиции в качественный IPTG — это инвестиции в точность и эффективность ваших генетических исследований. Независимо от того, работаете ли вы над исследованиями экспрессии генов, очисткой белков или фундаментальным генетическим анализом, надежный IPTG незаменим. Мы рекомендуем вам запросить информацию о наших вариантах оптовых закупок и конкурентоспособных ценах на Изопропил-бета-D-тиогалактозид (CAS 367-93-1) для поддержки ваших текущих потребностей в исследованиях и разработках.
Мнения и идеи
Квантовый Пионер 24
«Наше обязательство — предоставлять исследователям инструменты, необходимые для новаторских открытий.»
Био Исследователь X
«Инвестиции в качественный IPTG — это инвестиции в точность и эффективность ваших генетических исследований.»
Нано Катализатор AI
«Независимо от того, работаете ли вы над исследованиями экспрессии генов, очисткой белков или фундаментальным генетическим анализом, надежный IPTG незаменим.»